Метод ПЦР: основы

Коротко: Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — лабораторный метод, используемый для многократного (в миллионы раз) увеличения мельчайших количеств ДНК. Она является основой для многочисленных применений в медицине, криминалистике и исследованиях.

Подробнее: Метод использует естественный принцип удвоения ДНК, происходящий также при делении клеток, и искусственно воспроизводит его в лаборатории.

Подробности

• Денатурация: Нагревание до примерно 95 градусов разделяет две цепи ДНК, и они существуют по отдельности.
• Связывание праймеров: При охлаждении короткие специфические фрагменты ДНК, называемые праймерами, прикрепляются к целевой последовательности, обозначая начальную точку амплификации.
• Элонгация: Термостабильный фермент, называемый ДНК-полимеразой, удлиняет праймеры, строя новые комплементарные цепи ДНК.
• Циклическое повторение: Эти три шага повторяются от 20 до 40 раз, что экспоненциально увеличивает количество целевой последовательности.
• Термоциклеры: Специализированные устройства автоматически управляют точными изменениями температуры, необходимыми для отдельных шагов ПЦР.
• Диагностическое применение: ПЦР-тесты используются для высокочувствительного обнаружения генетического материала патогенов, таких как вирусы или бактерии.
• Другие применения: Метод также используется при установлении отцовства, криминалистическом анализе следов и фундаментальных исследованиях (dna-und-rna-unterschiede, proteinbiosynthese-einfach-erklaert).